Cara menghitung Nilai MPN, Uji Coliform

Pendekatan lain untuk enumerasi bakteri hidup adalah dengan metode MPN. MPN didasarkan pada metode statistik (teori kemungkinan). Metode MPN ini umumnya digunakan untuk menghitung jumlah bakteri pada air khususnya untuk mendeteksi adanya bakteri koliform yang merupakan kontaminan utama sumber air minum. Ciri-ciri utamanya yaitu bakteri gram negatif, batang pendek, tidak membentuk spora, memfermentasi laktosa menjadi asam dan gas yang dideteksi dalam waktu 24 jam inkubasi pada 37º C. Sampel ditumbuhkan pada seri tabung sebanyak 3 atau 5 buah tabung untuk setiap kelompok. Apabila dipakai 3 tabung maka disebut seri 3, dan jika dipakai 5 tabung maka disebut 5 seri. Media pada tabung adalah Lactose Broth yang diberi indikator perubahan pH dan ditambah tabung durham. Pemberian sampel pada tiap seri tabung berbeda-beda. Untuk sampel sebanyak 10 ml ditumbuhkan pada media LBDS (Lactose Broth Double Stegth) yang memiliki komposisi Beef extract (3 gr), peptone (5 gr), lactose (10 gr) dan Bromthymol Blue (0,2 %) per liternya. Untuk sampel 1 ml dan 0,1 ml dimasukkan pada media LBSS (Lactose Broth Single Stegth) yang berkomposisi sama tapi hanya kadar laktosa setengah dari LBDS yaitu 5 gr.

Berdasar sifat coliform, maka bakteri ini dapat memfermentasikan laktosa menjadi asam dan gas yang dideteksi oleh berubahnya warna dan gas dalam tabung durham. Nilai MPN ditentukan dengan kombinasi jumlah tabung positif (asam dan gas) tiap serinya setelah diinkubasi.

Cara kerja :
1. Sediakan 3 tabung berisi LBDS (9 ml tiap tabung) dan 6 tabung berisi LBSS (9 ml tiap tabung) lengkap dengan tabung durham. Atur kesembilan tabung menjadi 3 seri (seperti di gambar).
2. Kocok botol yang berisi air sampel.
3. Pindahkan suspensi air sample sebanyak 10 ml ke masing-masing tabung seri pertama (3 tabung LBDS), secara aseptis.
4. Pindahkan suspensi air sampel sebanyak 1 ml ke masing-masing tabung seri kedua (3 tabung LBSS), secara aseptis.
5. Pindahkan suspensi air sampel sebanyak 1 ml ke masing-masing tabung seri ketiga (3 tabung LBSS), secara aseptis.
6. Inkubasi semua tabung pada suhu 37º C selama 48 jam.
7. Lihat tabung gas positif (asam dan gas ; harus ada keduanya), lalu hitung tabung positif untuk tiap seri. Tulis kombinasi tabung positif tiap seri (misal : 3 2 1). Kombinasi angka tersebut lalu dicocokkan dengan tabel MPN untuk seri 3 sehingga diperoleh jumlah mikroba sebenarnya.

Misal :


didapatkan kombinasi jumlah tabung positif : 321 maka jumlah bakteri coliform adalah 150 sel/100 ml.

mikrobiologi tpc

TEKNIK DASAR ANALISA MIKROBIOLOGI
Filed under: Mikrobiologi

1)- TEKNIK AGAR SLANTS
Agar slants adalah kultivasi biakan mikroba ke dalam agar miring di dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik koloni bakteri yang tumbuh. Tiap bakteri memiliki karakteristik koloni yang berbeda. Karakteristik yang diamati pada koloni bakteri yang tumbuh adalah :
Tabel 5 : Karakteristik Pertumbuhan Koloni Bakteri

1. Ukuran : Diameter koloni yang diukur di dalam mm atau cm
2. Bentuk Keseluruhan Koloni : Sirkular, irregular, punctiform, rhizoid
3. Tepi / Margin : Entire, lobate, erose, undulate
4. Elevasi : Datar (flat), raised, convex (cembung), pulvinate, umbonate, crateriform
5. Permukaan : Wrinkled, rough (kasar), concentric rings, dull, glistening, waxy
6. Pigmentasi :

1. Warna : merah, kuning, krim, putih, tidak berwarna
2. Kelarutan dalam air : larut dalam air, tidak larut dalam air

1. Opasitas : Transparan, translucent, opaque
2. Bau : manis, putrefactive, fruity

Cara Kerja :
a) Tuang media Agar ke dalam tabung reaksi secara aseptis
b) Dinginkan dalam keadaan miring (+ 20-300)
c) Streak agar miring dengan biakan mikroba dengan jarum ose secara aseptis.
d) Inkubasi ke dalam inkubator dan amati bentuk koloni yang tumbuh

2)- TURBIDITAS MEDIA KALDU

Serupa dengan teknik agar slants, namun teknik turbiditas menggunakan media broth (kaldu) dan yang diamati adalah karakteristik kekeruhannya. Tiap mikroorganisme memiliki karakteristik turbiditas (kekeruhan) yang berbeda-beda. Ada diantara mikroorganisme yang membentuk partikel melayang (flocculent) di dalam media broth. Ada yang tersedimentasi, melayang di permukaan saja (pellicle) dan ada pula yang melayang di permukaan berbentuk seperti cincing (ring). Sebagaimana gambar di bawah.


Cara Kerja :
a) Tuang media broth ke dalam tabung reaksi secara aseptis
b) Ambil dengan cara menstreak biakan mikroba dari kultur.
c) Transfer dengan cara menstreak ke dalam tabung reaksi yang berisi broth tadi
d) Inkubasi ke dalam inkubator dan amati bentuk koloni yang tumbuh

3)- TEKNIK DILUSI (PENGENCERAN)
Teknik dilusi sangat penting di dalam analisa mikrobiologi. Karena hampir semua metode perhitungan jumlah sel mikroba mempergunakan teknik ini, seperti TPC (Total Plate Count).

Cara Kerja :
- Dari larutan kultur kita ambil 1 ml dan kita masukkan ke dalam 9 ml aquades atau larutan buffer pepton untuk memperoleh dilusi 1/10 bagian.
- Dari larutan dilusi 1/10 kita ambil 1 ml dan kita masukkan ke dalam 9 ml aquades atau larutan buffer pepton untuk memperoleh dilusi 1/100 bagian.
- Dari larutan dilusi 1/100 kita ambil 1 ml dan kita masukkan ke dalam 9 ml aquades atau larutan buffer pepton untuk memperoleh dilusi 1/1000 bagian.
- Dari larutan dilusi 1/1000 kita ambil 1 ml dan kita masukkan ke dalam 9 ml aquades atau larutan buffer pepton untuk memperoleh dilusi 1/10.000 bagian.
- Dst
Maksud dari 1/10, 1/100, 1/1000, 1/10.000 dst adalah suatu rasio dilusi yang apabila pada tiap dilusi ditumbuhkan ke dalam suatu media dan koloninya yang tumbuh dapat dihitung, maka jumlah sel mikroba dapat diketahui dengan cara :

Teknik dilusi sangat penting di dalam analisa mikrobiologi. Karena hampir semua metode perhitungan jumlah sel mikroba mempergunakan teknik ini, seperti TPC (Total Plate Count).

Cara Kerja :

- Dari larutan kultur kita ambil 1 ml dan kita masukkan ke dalam 9 ml aquades atau larutan buffer pepton untuk memperoleh dilusi 1/10 bagian.

- Dari larutan dilusi 1/10 kita ambil 1 ml dan kita masukkan ke dalam 9 ml aquades atau larutan buffer pepton untuk memperoleh dilusi 1/100 bagian.

- Dari larutan dilusi 1/100 kita ambil 1 ml dan kita masukkan ke dalam 9 ml aquades atau larutan buffer pepton untuk memperoleh dilusi 1/1000 bagian.

- Dari larutan dilusi 1/1000 kita ambil 1 ml dan kita masukkan ke dalam 9 ml aquades atau larutan buffer pepton untuk memperoleh dilusi 1/10.000 bagian.

- DstMaksud dari 1/10, 1/100, 1/1000, 1/10.000 dst adalah suatu rasio dilusi yang apabila pada tiap dilusi ditumbuhkan ke dalam suatu media dan koloninya yang tumbuh dapat dihitung, maka jumlah sel mikroba dapat diketahui dengan cara :

Jumlah koloni x 1
pengenceran

Misal :
Apabila pada dilusi 1/100 tumbuh sebanyak 20 koloni, maka dapat diketahui jumlah sel adalah :

20 koloni x
1
= 2000 sel

1/100

Apabila pada dilusi 1/1000 tumbuh sebanyak 3 koloni, maka dapat diketahui jumlah sel adalah :

2 koloni x
1
= 3000 sel
1/1000

Oleh karena itu, dengan metode dilusi kita dapat memperkirakan jumlah sel mikroba pada suatu benda atau produk.

TEKNIK POUR PLATE
Teknik pour plate (lempeng tuang) adalah suatu teknik di dalam menumbuhkan mikroorganisme di dalam media agar dengan cara mencampurkan media agar yang masih cair dengan stok kultur bakteri. Teknik ini biasa digunakan pada uji TPC (Total Plate Count). Kelebihan teknik ini adalah mikroorganisme yang tumbuh dapat tersebar merata pada media agar.

Cara Kerja :
Teknik pour plate (lempeng tuang) adalah suatu teknik di dalam menumbuhkan mikroorganisme di dalam media agar dengan cara mencampurkan media agar yang masih cair dengan stok kultur bakteri. Teknik ini biasa digunakan pada uji TPC (Total Plate Count). Kelebihan teknik ini adalah mikroorganisme yang tumbuh dapat tersebar merata pada media agar.Cara Kerja :
a) Pipet beberapa ml kultur bakteri campurkan ke dalam beberapa ml aquades sesuai dengan dilusi yang dikehendaki.
b) Aduk hingga merata dengan cara memutar tabung reaksi dengan telapak tangan selama beberapa kali.
c) Pipet larutan dilusi tadi sebanyak + 1 ml ke dalam cawan petri.
d) Tuang media agar yang masih cair (suhu + 50oC) ke dalam cawan petri tadi.
e) Putar cawan petri secara perlahan-lahan di atas meja horizontal untuk mengaduk campuran media agar dengan dilusi kultur mikroba.
f) Inkubasi dan amati pertumbuhan koloni bakteri.

4)- TEKNIK SPREAD PLATE
Teknik spread plate (lempeng sebar) adalah suatu teknik di dalam menumbuhkan mikroorganisme di dalam media agar dengan cara menuangkan stok kultur bakteri atau mengapuskannya di atas media agar yang telah memadat. Bedanya dengan pour plate adalah, pencampuran stok kultur bakteri dilakukan setelah media agar memadat sedangkan pour plate kultur dicampurkan ketika media masih cair (belum memadat). Kelebihan teknik ini adalah mikroorganisme yang tumbuh dapat tersebar merata pada bagian permukaan media agar.

Cara Kerja 1 : (dengan pipetting)
a) Tuang media agar cair ke dalam cawan petri, lalu biarkan hingga mengeras.
b) Pipet beberapa ml kultur bakteri campurkan ke dalam beberapa ml aquades sesuai dengan dilusi yang dikehendaki.
c) Aduk hingga merata dengan cara memutar tabung reaksi dengan telapak tangan selama beberapa kali.
d) Pipet larutan dilusi tadi sebanyak + 1 ml ke dalam cawan petri.
e) Putar cawan petri secara perlahan-lahan di atas meja untuk meratakan larutan dilusi tadi di atas permukaan media agar.
f) Inkubasi dan amati pertumbuhan koloni bakteri.

Cara Kerja 2 : (dengan swab/apus)
a) Tuang media agar cair ke dalam cawan petri, lalu biarkan hingga mengeras.
b) Pipet beberapa ml kultur bakteri campurkan ke dalam beberapa ml aquades sesuai dengan dilusi yang dikehendaki.
c) Aduk hingga merata dengan cara memutar tabung reaksi dengan telapak tangan selama beberapa kali.
d) Masukkan swab stick (tangkai apus) steril ke dalam tabung reaksi hingga bagian kapasnya tenggelam di dalam larutan dilusi. Usahkan memasukkan tangkai apus jangan sampai menyentuh dinding tabung reaksi.
e) Apus ke atas permukaan agar dengan perlahan-lahan secara merata. Ingat, usahakan jangan sampai agar hancur atau tergores.
f) Inkubasi dan amati pertumbuhan koloni bakteri.

5)- TEKNIK STREAK PLATE
Teknik streak plate (lempeng gores) adalah suatu teknik di dalam menumbuhkan mikroorganisme di dalam media agar dengan cara menstreak (menggores) permukaan agar dengan jarum ose yang telah diinokulasikan dengan kultur bakteri. Dengan teknik ini mikroorganisme yang tumbuh akan tampak dalam goresan-goresan inokulum bekas dari streak jarum ose.

Cara Kerja :
a) Tuang media agar cair ke dalam cawan petri, lalu biarkan hingga mengeras.
b) Bakar jarum ose dari bagian pangkal dalam terus hingga ke bagian lup (ujung) sampai berpijar merah.
c) Bakar bibir tabung reaksi yang berisi kultur bakteri dengan cara memutar tabung sehingga semua bagian bibir tabung terkena api.
d) Segera masukkan jarum ose ke dalam tabung reaksi, lalu segera keluarkan. Usahakan ketika memasukkan jarum ose jangan sampai menyentuh dinding tabung dan lakukan di dekat pembakar bunsen.
e) Bagi tiga bidang permukaan atas cawan petri yang akan distreak dengan spidol atau lainnya.
f) Streak ke atas permukaan agar dengan perlahan-lahan. Ingat, usahakan jangan sampai agar hancur atau tergores.
g) Arah streak pada permukaan agar menurut pembagian bidang tadi. Kemudian inkubasi dan amati koloninya.

Ungkapan Hati

bagai bintang di langit hitam

MataMu pNcarkn cahaya mNembus mataKu,
mNgusik geLap d hatiKu,
mNeraNgi stiap jejak laNgkah yg ku lalui,
tUk siNgkirkan sMua terjal jalan yg ku daki,

begitu paNjaNg jLan yg tLah kau & aku ukir,
beribu leMbaran tak'kan mMpu tUk tUlis kisah iNi,
naMun cukuplah 1 hati tUk siMpan meMory,
tUk pNjatkan cita meLaLui harap & do'a yg ucap t t'heNti,

stiap do'a & kata yg begitU b'makNa,
mNjadi peta tUk tUnjukKan jaLan dsaat k'sesatan,
stiap do'a yg kau paNjatkan,
beri ku k'kuatan tUk jaLaNi k'hidupaN,

bagiku kau bagai biNtang d laNgit yg hitaM,
saNgat setia mNemaNi reMbuLaN,
tak perNah lelah tRus mNeraNgi kehidupan,
teraNgi setiap jeNgkal laNgkah mereka dalam kegelapan,

itUlah diriMu...
Selalu setia teMaNiku,
selalu tRaNgi jaLanku dgn cahyaMu,
kau seLaMatkan diriku dLaM geLap'y hdupku..

jangan lupakan..!!

S'iNdah buNga yg b'mekaran,
kasih yg tLah kau beri bgtu iNdah,
q sgt takjUb pdaMu,
tiada 1 org puN yg dpt mNggantikanMu,

s'beNiNg eMbun pagi yg m'basahi ddauNan,
kau berikn suci'y ciNta yg t t'Noda,
wlw seriNgq mLukai hatiMu,
q hitaMkan putih'y ciNtaMu,

bgitu tiNggi dRajatMU d hati,
q tw bgitu sRiNg kasihMu q dustai,
bgitu bsar'y rasa syaNgMu yg q hiNdari,
q tw sMua tu m'bwtMu t'luka hati,

jika q hitUng,
malu hatiQ atas sMua tiNgkah lakuq,
q blas kasihMu dgn lukaQ,
q sgt mNyesal t pRnah m'bwtMu bhagia,

kiNi wlw brat,
q coba tUk gNti sMua luka yg q p'bwt,
q iNgin kau bNgga dgn sMua karya yg q bwt,
hiNgga keLak kau tLah tiada,
q iNgin kau t'sNyuM bNgga d atas sNa,

hatiQ sNaNtiasa b'kata,
"jgn pRnah lupakan..
Kasih yg tLah mReka briKn..!"


frOm yOur sOn..

ratu dalam hatiku..

hati ini terus mencari,,
berlari dan tak`kan pernah berhenti,
dan terus berharap semua itu akan terjadi lagi,
saat kau ada di sisi yuk hilangkan sepi,

ku taw kau terluka saatku tinggalkan ,
jiwaMu merana saatku menghilang,
tapi izinkan ku kini tuk hapuskan semua kesalahan,
ku kan menjaga pintu hatimu dengan penuh rasa sayang,

percayalah pada hatiku,
kanku pungut hatimu ke dalam ruang kosong dalam hatiku,
kan ku jaga hatimu dengan segenap kemampuanku,
takkan kubiarkan hatimu layu karenaku,

ku kan setia menunggumu,,
yakkan pernah ku lepas genggam hatimu,
karna ku taw hanya kau yang dapat menjadi ratu dalam hatiku,,
dan ku yakin kau telah tercipta untukku...

Truth from my heart

Akankah hari tu datang .??

Ketika gagah`y bumi tlah lenyap t`telan usia,,

Mentari yan mulai redup tak b`cahaya,,

Bintangpun tak sanggup lagi temani bintang tuk trangi malam,,

Yakinkan aku ada disana ,,

Ketika bumi tak kuasa tuk b`putar,,

Yakinkan ku slalu ada mNdekapmu hingga t`jaga,,

Ketika bulan tak lagi sanggup tuk terangi malam,,

Ku kan hadir tuk terangi malam ,,

Dengan segala cahaya yang ku punya,,

Ku kan temani hingga kau t`lelap dalam mimpi panjang hingga pagi mNjelang,,

Disaat mentari tak lagi mampu tuk terangi kehidupan,,

Dan dunia telah tenggelam dalam kegelapan,,

Yakinkan ku khan datang di sana,,

Ku kan temani kau di sisa akhir masa kehidupan,,

I want to shine on you,,

And always like the dazzling sun,,

I will defend you from all the darkness,,

This is the truth from my heart,,

Coz your love is alive in me ,,

Forever,,

And ever…

Masihkah..??

Hujan malam ini terus turun tak terhenti,,

Belaian lembut angin,,

Di ikuti kerasnya detak jam yang ku dengar kini,,

Membwat suasana hening dan uadara dingin yang semakin menjadi – jadi,,

Mata ini semakin sulit ku pejamkan,,

Remang lampu kamar tak cukup mampu tuk mengundang lelah,,

Yang terjadi hanya angan yang semakin melayang tanpa arah,,

Dan terbayang hari – hari yang ku lewati sudah,,

Sejenak ku terdiam,,

Begitu asyiknya mataku tak hrenti menatap jam,,

Sudah berapa lama waktu yang telah ku buang.??

Ahh,, ku merasa kulah pecundang yang takkan pernah bisa menang,,

Setiap hari,,

Ku hanya bisa bersembunyi,,

Ku tak sanggup tuk jalani skenario hidup yang harus ku hadapi,,

Ku hanya bisa berdusta agar tak seorangpun mengetahui,,

Masihkah hati ini kan menerima.??

Bila mulut indah ini selalu tersenyum tuk tutupi luka,,

Akankah hati ini bahagia,.?

Pabila ku tertawa tuk menahan air mata,,

Bisakah hati ini kan mengerti,.??

Jika sebenarnya dusta ini tak ku lakukan sepenuh hati,

Karena ku lakukan ni tuk tu2pi semua luka hati,

Dan tak ada satupun yang dapat mengerti...

Hapus ingatanKu..!!

Indah semua kata yang pernah kau ucapkan,,

Saat dunia masih tertawa melihat ulah kita,,

Ketika dukaku telah menjadi dukamu,,

Bahagiaku adalah bahagiamu juga,,

Sadarkah.??

Disini ku terus mengenang semua itu,,

Masa yang telah tertinggal jauh di belakangku,,

Apa kau disana merasa kan hal yang sama denganku??

Andaikan kau selalu merindukan semua itu,,

Izinkan ku datang padamu,,

Tuk lanjutkan hidupku,,

Bersama bayang2 dirimu dari masa lalu,,

Kan ku rangkai kembali semua yang telah terbuang.,

kan ku bingkai kembali semua kenangan,,

kan ku terangi semua itu dengan bintang impian,,

bintang impian yang dulu selalu menerangi perjalanan,,

tapi pabila kau telah mencoba tuk lupakan itu,,

izinkan aku tuk tu2p rapat pintu hatiku,,

kan ku biarkan kau bahagia tanpa hadirku,,

dan biarlah bayang2 dirimu menghilang dalam mimpiku,,

rentang waktu yang telah kita jalani,,

biarkan semua itu menghilang dan pergi,,

mungkin semua itu memang tak layak abadi,,

kini biarlah aku hapus ingatan dalam diri..

Cinta tak harus memiliki.??

Tak terpejam mata ini,,

Di malam yang terasa semakin sunyi,,

Yang ku dengar hanya ungkapan kata dalam nada syair,,

Mengalun lembut menyejukkan batin,,

Nada itu terdengar semakin nyair,,

Tentang luka hati yang terangkum dalam satu syair,,

M`bwatku teringatkan satu kalimat sakti,,

Bahwa cinta tak harus memiliki,,

Ku berdetak kagum,,

Tak semua orang bisa ungkapkan kata itu,,

Ketika cinta telah terasa semu,,

Dan membwt satu belenggu,,

Mungkin memang benarsemua ini,,

Disaat cinta pertama kali b`semi,,

Begitu indah janji2,,

Terasa 2 diri telah menjadi 1 hati,,

Namun seiring berjalan`y wktu,,

Cinta mulai goyah.,

Cinta tak lagi 1 arah,,

Yang terjadi hanya hati yang luapkan amarah,,

Lelah pabila begini,,

Terus b`janji dan ingkari sudah mNjadi tradisi,,

Tak baik bila terus luapkan emosi,,

Bukankah lebih baik cinta jalan sendiri2.??

Tak perlu lagi senyum kebohongan,,

Tak usah lagi gandeng tangan jika tak lagi sejalan,,

Tak ingin lagi mati2an berkorban,,

Demi cinta yang tak lagi bisa diharapkan,..



lembaran hati

Ku kMbaLi t'baNgun,
dari miMpi pNjaNg yg t brujuNg,
dari masa LaLu yg tLah LaMa m'bisu,
t'KuMpuL dLam 1 buKu yg uSaNg & b'debu..

ku iNgiN m'buka kMbaLi LeMbaran LaLu,
dgn scaNgkir teh haNgat tMaNi pagiku,
meNduNg'y aWan s'aKan mNgerti dgn pRasaan dLam hatiku..

LeMbar2 k'hidupan muLai t'Lewati..
SdiKit kNaNgan masa LaLu m'berikan warNa-warNi..

kiNi ku t'heNti dLam 1 LeMbaran hati,
t'Lihat 4 so2k diri meNyatU dLam 1. Hati,
m'bwtKu t'riNgat pada 1 jaNji..

"SaMpai naNti., saMpai mati., wLaw raga kita b'pisah., tapi hati kita 'kan s'LaLu b'saMa, mNyatU dan Tak perNah B'piSah..!!"



..Just 4 U aLL,, guys.!!..
~RiCAT~



Kini Ku Menyesal

Mntari mNutUp mata'y..
KiLau pLaNgi yg t'hupus oLeh LaNgit hitam..
B'saMa dgn diri yg msih t'diam,
m'bayaNg 'n tNggLam pNyesaLan..

sMpai kpan truz b'seMi.?
PNyesaLan yg t b'tepi,
b'sMayam 'n mNetap dLam hati,
t'ukir t pRnah t'kikis habis..

harus'y ku bisa phami,
sMua yg tLah kau aLami,
harus'y kau t pRnah hdir disiNi,
agar ku t mNyesaL t pRnah bsa mNgerti,

andai ku dpt mMiLih,
waktU yg kan ku seLami,
kan ku pLih 1 hari,
saat ku ucapkn kata yg tkan pRnah ku uLaNgi,

kan ku bisikkn,
kan ku triakkn,
hNgga sLuruh psaNg tLiNga mNdeNgar.,
maaf ku yg t pRNah sMpat ku ucapkan.!!

kiNi ku mNyesaL,
andai wktU dpt ku gNggam..
Kan ku sapa.,
kan ku jaga.,
geNggam..
WLaw dgn 1 sNyuMan..


Persetan Segalanya....!!

Ungkapan,,
sribu uNgkapan m'jLaskn ttg Nya..
BeNarkah.?
Atw hNya buaLan yg dLakukn tuk tKLukkn sgaLa'y.?!

bribu syarat 'n tUntUtan,
yg trasa t'pksa,
dan uruNg tUk d rasa..
HNya raga yg Lkukan deMi paNdaNgan..
PandaNgan mereka.!!

jiwa sbNar'y mNoLak,
kbebasan ekspResi diri yg t'ikat..
OLeh bribu tUntUtan yg hrus d Lakukan,
tNpa tw pa yg kn d berikan..

hNya b'iMiNg2kn k'iNdahan..
Yg sbNar'y t b'wujud 'n t nyata..

HaNya sbuah harapan..
TUk dpt raih 'n jdikn kNyataan..

naMun...
BuLshit..!!

we'll say goOdbye Lost Heaven,
How we LoNged for Heaven.!
We're LettiNg go of sOmethiNg we never had..
TiMe goes so fast..
Heaven is Lost.!!


bulan tuk ucapkan maaf..???

TeLapak tNgan yg Luas t'buka.,
mNdadak t'tUtUp,
gNggaman peNuh oLeh Lmbaran,
hNgga 2 teLapak tNgan t cukup..

ruMah mereka yg t b'kLuarga,
kiNi b'jeJaLan baraNg 'n aMpLop yg bgitU tebaL'y,
pdahaL, duLu t pRnah da yg siNggah,
bahkan 1 teNgok puN eNggan..

ruMah TuhaNku,
kiNi raMai oLeh haMbaMu,
bhkan mereka reLa b'desakkn,
dan t taNgguNg mMakan sparuh jLan..

sMpai tU kah dMpak hdir'y bULan baru.?
Mereka mNdadak brubah mNgikuti treNd waktU..
MNgapa mReka b'boNdoNg tUk b'buru.?
PdahaL dahuLu....

istiMeWa'y buLaN-Mu..
SMua b'LoMba m'jdi org pRtaMa yg ucpkan mav,
pdahaL tU Lah kata yg pLiNg t dpt d ucap dULu..
Tu Lah kata yg asiNg d teLiNga..

nMun kiNi kata tU tLah m'jdi pNyakit mNuLar,
yg mNyeraNg aNak, reMaja, bhkan dewasa..

apakh kata tU hNya khusus d ucpkan pda buLan ni saja.?
Pa kah buLan Laen'y t paNtas d jdikan buLan tUk ucpkan kata mav.?



maaf,,, ~semua itu terlalu indah bagiku..!~

GuLita t'pejaM yg t pRnah usai,.
BgitU Lama rasa tU q hiraukn,.
Ckup tUk usir panas n dtgkn hujan,
T trasa hNgga wktU pisahkn,.

bgitU bNyak ksMpatan tU q buaNg,
hNya tUk ucapkn 1 kta yg t'kan t'sMpaikn,
q mNyesal...
TLah isi Lmbar hidupMu dgn ksedihan..

mNgkin q mMaNg pcuNdang,
yg t'kn pRnah bsa akui ksaLahan,
q mMaNg t pNtas jdi pMeNaNg,
yg sMpurNa lalui tNpa cacat khidupan..

sMpai kpn q hrus t'diam.?
MNuNggu lidahq mNcair dri bekuNya..

akankh q bsa mNcariMu.?
DpatiMu tUk ketUk piNtU hatiMu..
TUk dpatkn ceLah hatiMu..
Agar q mMpu mNerobos diNdiNg tbaL yg haLaNgi,
dgn b'juta cahya yg q bNtUk peLaNgi..

shg q mMpu bka kMbLi mataq d hdapMu,
tUk triakkn mavq d tLiNgaMu,
bhwa ksaLahn q Lah yg tLah m'bwt q sLaLu mNgingatMu,

mav kan q t pRnah sapaMu,
mav kan q t paNdaNg hadirMu,
q tw sMua tU skitKnMu,
tpi q hNya mrasa t pNtas tUk paNdaNgi iNdahMu..
Smua tU t'lalu iNdah bagi q..

KARBOHIDRAT

§ Pengertian Karbohidrat

Secara sederhana dapat diartikan bahwa karbohidrat ialah suatu senyawa yang terdiri dari molekul-molekul karbon (C), hydrogen (H) dan oksigen (O) atau karbon dan hidrat (H2O) sehingga dinamaka karbo-hidrat. Dalam tumbuhan senyawa ini dibentuk melaui proses fotosintesis antara air (H2O) dengan karbondioksida (CO2) dengan bantuan sinra matahari (UV) menghasilkan senyawa sakarida dengan rumus (CH2O)n.

§ Fungsi Karbohidrat

Ada banyak fungsi dari karbohidrat dalam penerapannya di industri pangan, farmasi maupun dalam kehidupan manusia sehari-hari. Diantara fungsi dan kegunaan itu ialah :

a. Sebagai sumber kalori atau energi

b. Sebagai bahan pemanis dan pengawet

c. Sebagai bahan pengisi dan pembentuk

d. Sebagai bahan penstabil

e. Sebagai sumber flavor (karamel)

f. Sebagai sumber serat

§ Klasifikasi Karbohidrat

Karbohidrat dapat digolongan menjadi dua (2) macam yaitu karbohidrat sederhana dengan karbohidrat komplek atau dapat pula menjadi tiga (3) macam, yaitu :

a. Monosakarida (karbohidrat tunggal)

Kelompok monosakarida dibedakan menjadi dua (2) macam, yaitu pentosa yang tersusun dari lima (5) atom karbon (arabinosa, ribose, xylosa) dan heksosa yang tersusun dari enam (6) atom karbon (fruktosa/levulosa, glukosa, dan galaktosa).

Struktu glukosa dan fruktosa digunakan sebagai dasar untuk membedakan antara gula reduksi dan gula non-reduksi. Penamaan gula reduksi ialah didasarkan pada adanya gugus aldehid (–CHO pada glukosa dan galaktosa) yang dapat mereduksi larutan Cu2SO4 membentuk endapan merah bata. Adapun gula non-reduksi ialah gula yang tidak dapat mereduksi akibat tidak adanya gugus aldehid seperti pada fruktosa dan sukrosa/dektrosa yang memiliki gugus keton (C=O).

D-Glukosa (Fischer) D-Glukosa (Haworth)

b. Oligosakarida (tersusun dari beberapa monosakarida)

Kelompok ini terdiri dari banyak jenis, seperti disakarida, trisakarida, tetrasakarida, dll. Namun paling banyak dipelajari ialah kelompok disakarida yang terdiri dari maltosa, laktosa dan sukrosa (dekstrosa). Dua dari jenis disakarida ini termasuk gula reduksi (laktosa dan maltosa) sedangkan sukrosa tidak termasuk gula reduksi (nonreducing).

c. Polisakarida (tersusun lebih dari 10 monosakarida)

Kelompok ini terdiri dari tiga (3) jenis yaitu :

1. Homopolisakarida

Yaitu polisakarida yang tersusun atas satu jenis dari monosakarida yang diikat oleh ikatan glikosida, seperti galactan, mannan, fructosans, dan glucosans (cellulose, dextrin, glycogen, dan starch/pati)

2. Heteropolisakarida

3. Polisakarida mengandung N (chitin)

§ Pengujian Karbohidrat

a. Uji Kualitatif

Pengujian ini dapat dilakukan dengan dua (2) macam cara, yaitu; pertama menggunakan reaksi pembentukan warna dan yang kedua menggunakan prinsip kromatografi (TLC/Thin Layer Cromatograpgy, GC/Gas Cromatography, HPLC/High Performance Liquid Cromatography). Dikarenakan efisiensi pengujian, pada umumnya untuk pengujian secara kualitatif hanya digunakan prinsip yang pertama yaitu adanya pembentukan warna sebagai dasar penentuan kandungan karbohidrat dalam suatu bahan. Sedikitnya ada tujuh (7) macam reaksi pembentukan warna, yaitu :

1. Reaksi Molisch

KH (pentose) + H2SO4 pekat à furfural à + a naftol à warna ungu

KH (heksosa) + H2SO4 pekat à HM-furfural à + a naftol à warna ungu

Kedua macam reaksi diatas berlaku umum, baik untuk aldosa (-CHO) maupun karbohidrat kelompok ketosa (C=O).

2. Reaksi Benedict

KH + camp CuSO4, Na-Sitrat, Na2CO3 à Cu2O endapan merah bata

3. Reaksi Barfoed

KH + camp CuSO4 dan CH3COOH à Cu2O endapan merah bata

4. Reaksi Fehling

KH + camp CuSO4, K-Na-tatrat, NaOH à Cu2O endapan merah bata

Ketiga reaksi diatas memiliki prinsip yang hampir sama, yaitu menggunakan gugus aldehid pada gula untuk mereduksi senyawa Cu2SO4 menjadi Cu2O (enpadan berwarna merah bata) setelah dipanaskan pada suasana basa (Benedict dan Fehling) atau asam (Barfoed) dengan ditambahkan agen pengikat (chelating agent) seperti Na-sitrat dan K-Na-tatrat.

5. Reaksi Iodium

KH (poilisakarida) + Iod (I2) à warna spesifik (biru kehitaman)

6. Reaksi Seliwanoff

KH (ketosa) + H2SO4 à furfural à + resorsinol à warna merah.

KH (aldosa) + H2SO4 à furfural à + resorsinol à negatif

7. Reaksi Osazon

Reaksi ini dapat digunakan baik untuk larutan aldosa maupun ketosa, yaitu dengan menambahkan larutan fenilhidrazin, lalu dipanaskan hingga terbentuk kristal berwarna kuning yang dinamakan hidrazon (osazon).

b. Uji Kuantitatif

Untuk penetapan kadar karbohidrat dapat dilakukan dengan metode fisika, kimia, enzimatik, dan kromatografi (tidak dibahas).

1. Metode Fisika

Ada dua (2) macam, yaitu :

a. Berdasarkan indeks bias

Cara ini menggunakan alat yang dinamakan refraktometer, yaitu dengan rumus :

X = [(A+B)C - BD)]

4

dimana :

X = % sukrosa atau gula yang diperoleh

A = berat larutan sampel (g)


B. KARBOHIDRAT
Karbohidrat adalah senyawa organik terbesar diseluruh mahluk hidup, dengan rumus umum Cn(H2O)n. Secara kimia senyawa-senyawa ini adalah turunan ALDEHID atau KETON dari Polialkohol. Karbohidrat adalah bagian dari zat gizi utama dan berperan sebagai sumber energi. Sebagai sumber energi terutama pada manusia, karbohidrat dikonsumsi sebagai Polisakarida, Disakarida dan Monosakarida. Polisakarida adalah polimer dari monosakarida dan mempunyai rumus umum {Cn(H2O)n}n. Polisakarida yang menjadi sumber makanan manusia terpenting adalah pati (amilum) yang dijumpai pada biji-biji seperti padi, gandum, jagung serta berbagai umbi seperti kentang, talas, ketela, ubi jalar, dan sebagainya.
Disakarida (C12H22O11) adalah dimer (ikatan dari dua unit) monosakarida dan yang lazim dikonsumsi adalah Maltosa dan Sakrosa. Maltosa terdiri dari dua molekul glukosa dan berasal dari pemecahan pati dan banyak dijumpai dalam sirup dan terdiri atas dua molekul glukosa. Sukrosa dan Sakarosa lebih sering dikenal sebagai gula pasir. Secara kimia, Sukrosa terdiri dari Gukosa dan Sukrosa. Satu-satunya Disakarida yang dihasilkan oleh mamalia adalah Laktosa, yang merupakan komponen karbohidrat dari air susu ibu. Laktosa terdiri atas agalukosa dan Galaktosa, yang terikat satu dengan yang lain. Glukosa, Galaktosa dan Fruktosa adalah Monosakarisa atau karbohidrat elementer yang mempunyai 6 atom C, karena itu merupakan Heksosa sehingga rumusnya adalah C6H12O6. Glukosa dan Galaktosa merupakan Aldosa (Gula dengan gugus Aldehida), sedangkan Fruktosa adalah Ketosa (gula dengan gugus keton)

PERCOBAAN KARBOHIDRAT DAPAT DILAKUKAN DENGAN CARA SEBAGAI BERIKUT:
1. Uji Molisch
Tujuannya: Membedakan karbohidrat dengan senyawa bukan karbohidrat
Dasarnya : Pembentukan fulfural atau turunannya karena penarikan molekul air oleh asam sulfat pekat. Fulfural yang terbentuk berekasi dengan ?-naftol, membentuk senyawa yang berwarna ungu.
2. Uji Iodium
Tujuannya: Membedakan polisakarida dari disakarida dan monosakarida
Dasarnya : Molekul pati mempunyai struktur tiga dimensi berupa spiral, dalam struktur ini molekul pati dapat mengikat molekul iodium secar fisik, dengan cara menempatkan iodium tersebut kedalam spiral, sehingga kompleks tersebut berwarna biru. Bila larutan dipanaskan, struktur spiral akan hilang sehingga molekul pati tidak dapat lagi mengikat iodium. Akibatnya, warna biru juga hilang. Monosakarida dan isakarida tidak memberikan warna biru dengan iodium.
3. Uji Barfoed
Tujuannya: Membedakan disakarida dengan monosakarida
Dasarnya : Reduksi oleh karbohidrat dalam suasana asam. Pada reaksi yang positif, alrutan akan berwarna biru tua setelah penambahan pereaksi fosfomolibdat. Reaksi ini positif untuk monosakarida.
4. Uji Seliwanoff
Tujuannya: Membedakan ketosa dengan aldosa
Dasarnya : mirip dengan uji molisch, hanya disini ketosa membentuk 4-hidroksimetilfurt yang dengan resorsinol membentuk senyawa baru berwarna anggu.
5. Uji Benedict dan Sifat Antioksidan Vitamin C
a. Uji Benedict
Tujuannya: Memperlihatkan sifat mereduksi dari beberapa kabohidrat dan vitamin C
Dasarnya : Gugus aldehid atau keton bebas dalam suatu senyawa, seperti pada karbohidrat, akan mereduksi Cu2+ menjadi Cu+ yang tidak larut dalam suasana basa. Sifat mereduksi ini juga ditemikan pada vitamin C
b. Uji Sifat Antioksidan
Tujuannya: Memperlihatkan sifat antioksidan vitamin C.
Dasarnya : Buah-buahan, antara lain pisang, mengandung senyawa-senyawa fenol yang mudah dioksidasi oleh udara membentuk senyawa berwarna coklat kehitaman. Adanya vitamin C mencegah oksidasi senyawa fenol oleh udara.
6. Peragian
Tujuannya: - Memperlihatkan bahwa mikroorganisme dapat mengoksidasi karbohidrat tanpa adanya O2.
- Memperlihatkan bahwa laktosa tidak dapat diragikan
Dasarnya : Dalam peragian, karbohidrat dioksidasi dalam keadaan anaerob (tidak ada oksigen) oleh mikroorganisme. Hasilnya, terbentuk gas CO2 (berupa gelembung) dan etanol (C2H5OH).

C. LEMAK
Lemak adalah senyawa organik alamiah yang tidak terlarutkan dalam air, tetapi larut dalam pelarut organik seperti Etanol panas, eter, aseton, kloroform, karbontetraklor, benzena, toluena dan lain-lain.
Fungsi utama lemak: sebagai penyekat, bantalan dan cadangan energi. Fungsi penyekat tampak jelas pada membran sel. Seluruh sel mahluk hidup dibungkus oleh membran yang antara lain terdiri dari molekul-molekul lemak yang tersusun sedemikian rupa sehingga isi sel terpisah dari dunia luar. Fungsi penyekat tampak jelas pula pada sel-sel syaraf. Baik sel syaraf maupun serat syaraf diliputi oleh sarung pembungkus yang disebut MIELIN, yang terutama terdiri atas lemak. Fungsi sebagai bantalan tampak misalnya pada jaringan bawah kulit, yang menebal ditempat-tempat tertentu dan juga disekitar berbagai alat didalam rongga tubuh dan dibelakang bola mata. Lemak juga merupakan bentuk cadangan energi bagi tubuh. Senyawa ini dibentuk bila tubuh kelebihan makanan dan dipecah bila tubuh kekurangan energi. Secara kasar tampak dalam bentuk perubahan berat badan atau dalam bentuk gemuk dan kurus.

SECARA KIMIA, LEMAK TERBAGI TIGA (3), yaitu:

1. Lemak Sederhana
Lemak jenis ini bila dihidrolisis akan menghasilkan alkohol, biasanya berupa gliserol, serta menghasilkan asam lemak. Contoh yang paling banak ditemukan adalah Triasilgliserol yang disebut juga Trigliserida (TG), yang ditemukan antara lain dalam serum, dalam minyak kelapa dan dalam berbagai minya lain yang berasal dari mahluk hidup. Yang dimaksud dengan minyak adalah lemak yang dalam suhu ruang berada dalam bentuk cair , lemak yang dalam suhu ruang masih berbentuk padat disebut lemak saja. Biasanya minyak berasal dari tumbuhan dan lemak dari hewan. Konsistensi cair atau padat pada suhu ruang ini biasanya ditentukan dari jumlah atom C yang menyusun asam lemak dari TG. Makin panjang atom C, biasanya makin padat. Dilain pihak, makin banyak ikatan rangkap, konsistensi semakin cair. Lemak yang banyak mengandung ikatan rangkap ini disebut asam lemak essensial, yang harus ada dalam makanan. Lemak tumbuhan berupa minyak karena jumlah atom C-nya lebih pendek dan ikatan rangkapnya relatif lebih banyak.

2. Lemak Majemuk
Lemak jenis ini bila dihidrolisis akan menghasilkan alkohol, asam lemak dan senyawa lain seperti fosfat, asam amino, basa organik, sepert kolin atau betain. Umumnya lemak majemuk mengandung listrik atau paling tidak mempunyai pengkutuban muatan dalam molekulnya, sehingga menjadi lebih mudah berinteraksi dengan air. Lemak Majemuk ini ikut menyusun membran sel dan juga selubung sel dan serat syaraf.

3. Turunan Lemak
Yaitu berbagai senyawa yang diperoleh dari hidrolisis atau pemecahan kedua jenis lemak terdahulu. Yang termasuk dalam kelompok ini adalah Gliserol dan berbagai alkohol lain yang ikut menyusun lemak, asam lemak, dengan ikatan rangkap (ikatan tak jenuh) dan asam lemak tanpa ikatan rangkap (jenuh), kolesterol dan berbagai macam senyawa steroid seperti hormon steroid (kortisol, prednison, estrogen, progesteron, testosteron, dan aldosteron).
Meskipun bukan termasuk lemak, perlu juga diketahui bahwa vitamin-vitamin A, D, E dan K sangat memerlukan lemak untuk dapat diserap dan digunakan tubuh. Karena vitamin-vitamin ini tidak larut dalam air dan hanya larut dalam lemak atau pelarut lemak.

PERCOBAAN LEMAK DAPAT DILAKUKAN DENGAN CARA:
a. Uji Kelarutan
Tujuannya: Memperlihatkan bahwa lemak tidak larut dalam air dan hanya larut dalam pelarut organik.
Dasarnya : Molekul lemak berinteraksi dengan molekul pelarut organik dalam bentuk interaksi hidrofobik, sehingga lemak tersebar merata diantara pelarut organik dan dikelilingi oleh senyawa tersebut. Interaksi ini tidak terjadi dengan molekul air.
b. Uji Pengemulsian Lemak
Tujuannya: Memperlihatkan bahwa minyak dan air dapat dicampur secara merata dalam bentuk emulsi, dengan bantuan suatu bahan pengemulsi.
Dasarnya : Suatu senyawa dikatakan pengemulsi jika dapat larut, baik dalam air maupun dalam minyak. Adanya bahan pengemulsi ini menyebabkan minyak tersebar merata dan stabil diantara molekul-molekul air.
c. Uji Kejenuhan Lemak
Tujuannya: Memperlihatkan bahwa minyak, terutama minyak nabati, ada yang jenuh (tidak mempunyai ikatan rangkap) dan ada pula yang tidak jenuh (mempunyai ikatan rangkap)
Dasarnya : Minyak tidak jenuh akan mengaddisi iodium (I2) sehingga ikatan rangkapnya hilang. Bersamaan dengan itu, warna coklat di iodium juga akan hilang.

d. Pembentukan Sabun
Tujuannya: Memperlihatkan bahwa lemak padat dapat dibuat larut setelah dihidrolisis dalam asam. Penambahan basa akan menyebabkan terbentuknya sabun.
Dasarnya : Lemak dipecah menjadi gliserol dan asam lemak rantai panjang oleh asam, sehingga lemak padat tersebt akan menjadi lemak cair yang dibentuk oleh asam lemak. Penambahan basa akan menyebabkan terbentuknya sabun, yang ditandai oleh hilangnya bidang batas.
e. Uji Kolesterol
Tujuannya: Memperlihatkan bahwa kolesterol tidak terdapat dalam minyak nabati, melainkan dalam sumber hewani.
Dasarnya : Kolesterol akan membentuk warna merah, biru dan ungu bila direaksikan dengan H2SO4 pekat (reaksi Salkowski)
f. Vitamin A dan D dalam Minyak Ikan
Tujuannya: Memperlihatkan bahwa Vitamin A dan Vitamin D larut dalam lemak dan terdapat dalam minyak ikan.
Dasarnya : Vitamin A dalam minyak ikan akan bereaksi dengan pereaksi Carr-Price (SbCl3 dalam kloroform) membentuk senyawa berwarna biru. Untuk melacak vitamin D dalam bahan yang sama dan dengan pereaksi yang sama, vitamin A dirusak dahulu secar oksidatif dengan penambahan H2O2 dan pemanasan. Adanya warna jingga-kuning pada minyak ikan pada penambahan pereaksi Carr-Price sesudah oksidasi menunjukkan adanya vitamin D.

D. PROTEIN
Protein berasal dari bahasa Yunani yaitu Proteos, artinya yang terutama atau terbanyak adalah senyawa organik yang terbanyak dalam sel mahluk hidup. Secara kimia, protein adalah Heterobioplimer yang terdiri atas satuan-satuan monomer yang disebut asam amino yang dihubungkan dengan ikatan Peptida. Protein ditemukan dalam seluruh mahluk hidup mulai dari virus sampai manusia. Ada puluhan ribu macam protein berbeda, yang tersebar diberbagai mahluk hidup tersebut. Meskipun demikian diperlukan hanya 20 jenis asam amino saja untuk menyusun berbagai macam protein tersebut. Tumbuhan dan bakteri dapat membuat sendiri bahan penyusun protein yaitu asam amino, dari nitrogen organik, akan tetapi binatang dan manusia memerlukan sebagian asam amino yang sudah jadi untuk membentuk protein.

Asam Amino yang diperlukan tubuh dapat dibagi menjadi dua (2) kelompok, yaitu:
1. Asam amino essensial, yaitu asam amino yang mutlak harus ada dalam makanan, karena tidak dapat dibentuk oleh tubuh. Asam amino tersebut adalah Triptofan, Fenilalanin, Lisin, Treonin, Valin, Metionin, Leusia, Isoleusin, Arginin, dan Histidin.
2. Asam amino non essensial, yaitu asam amino yang dapat dibentuk oleh tubuh.
Rumus umum protein adalah:

H O R H O
H2N — C — C — N — C — C = O -----> N — C — C — OH
R1 H H R(n)

- NH2 : gugus amino
- CO - : gugus karboksil
- CO – NH - : ikatan peptida
- R1, R2, dan Rn : rantai samping asam-asam amino pembentuk protein

Secara Kimia, protein dibagi menjadi dua (2) jenis:
1. Protein Sederhana
Protein ini bila dihidrolisis hanya menghasilkanasam amino alfa atau turunannya.
Contoh:albumin dan globulin

2. Protein Terkonjugasi

Protein dapat dihidrolisis menjadi asam amino:
a. Dengan asam kuat, misalnya HCl atau H2SO4, disertai dengan pemanasan, atau
b. Dengan basa, atau
c. Dengan enzim proteolitik, seperti pepsin, tripsin atau papain.

Struktur protein:
Asam-asam amino dalam molekul protein dihubungkan oleh ikatan peptida menjadi polipeptida yang membentuk struktur primer. Rangkaian asam-asam amino dalam polipeptida berinteraksi satu sama lain, sehingga rangkaian tersebut mengambil bentuk tertentu yang dapat berupa kumparan (heliks), gelombang atau sulur tidak beraturan. Struktur tersebut dinamakan struktur sekunder. Secara keseluruhan suatu protein atau polipeptida mempunyai bentuk tiga dimensi tertentu yang dinamakan struktur tersier. Suatu protein mempunyai struktur tersier berbeda-beda susuai kondisi lingkungan. Hanya dalam kondisi fisiologis struktur tersier ini mengambil bentuk tertentu yang mendukung fungsi protein tersebut. Secara garis besar, struktur tersier ada dua (2) macam, yaitu yang lebih kurang berbentuk bola (globuler) dan yang berupa serat (fibriler)
Fungsi protein ditentukan oleh struktur tersier yang tepat (fisiologis). Fungsi tersebut sangat rentan terhadap perubahan lingkungan, seperti keasaman (pH) dan suhu ektrim. Selain itu, fungsi protein juga hilang oleh adanya logam berat seperti Pb, Cd, dan Hg.

Umumnya fungsi protein adalah:
1. Sebagai Katalis dan dinamakan enzim
2. Sebagai alat pertahanan tubuh seperti imunoglobulin (antibodi)
3. Sebagai alat pembawa senyawa lain (transport), seperti Hb (untuk oksigen), transferin (untuk besi) atau lipoprotein (untuk lemak)
4. Sebagai pembawa isyarat dari sel lain, seperti hormon FSH, LH, hCG
5. Sebagai penggumpal darah pada luka, seperti fibronogen
6. Sebagai cadangan asam amino, seperti albumin
7. Sebagai penerima isyarat dari luar, seperti reseptor hormon dalam sel
8. Sebagai pengatur kegiatan inti sel

Didalam air, protein larut dalam bentuk larutan koloid. Untuk itu sangat diperlukan interaksi antara berbagai gugus R dari asam-asam amino dalam protein dengan molekul air. Semua keadaan yang menyebabkan tertariknya air yang mengelilingi molekul protein ini sangat mengurangi kelarutan protein.

PERCOBAAN PROTEIN DAPAT DILAKUKAN DENGAN CARA:
a. Reaksi Biuret
Tujuannya: memperlihatkan bahwa protein mengandung ikatan peptida
Dasarnya : Gugus –CO dan –NH dari ikatan peptida dalam molekul protein membentuk warna lembayung bila direaksikan dengan ion Cu2+ dalam suasana alkali

b. Reaksi Xantoprotein
Tujuannya: memperlihatkan bahwa protein tertentu mengandung asam amino dan inti benzen
Dasarnya : Nitrasi inti benzen dari asam amino dalam molekul protein (tirosin, fenilalanin, triptofan) menjadi senyawa nitro yang berwarna kuning. Dalam lingkungan alkalis terionisasi dan warnanya berubah menjadi tua atau jingga.

c. Reaksi Millon
Tujuannya: memperlihatkan bahwa protein mengandung asam amino dengan inti fenol (tirosin)
Dasarnya : Nitrasi derivat monofenol dari asam amino tirosin dalam protein

d. Reaksi Hopkins-Cole
Tujuannya: memperlihatkan bahwa protein mengandung asam amino triptofan
Dasarnya : triptofan yang terdapat dalam protein berkondensasi dengan asam glioksilat yang dengan asam pekat membentuk kompleks berwarna

e. Pengendapan Protein dengan garam konsentrasi Tinggi (Salting Out)
Tujuannya: memperlihatkan bahwa protein dapat dipisahkan dengan cara diendapkan dengan menggunakan larutan garam dengan konsentrasi berbeda
Dasarnya : protein larut dalam air sebagai larutan koloid. Bila molekul air yang mengelilinginya ditarik, misalnya dengan larutan garam konsentrasi tinggi atau dengan alkohol, maka protein akan mengendap. Beberapa jenis protein dalam suatu larutan akan diendapkan oleh garam dalam konsentrasi berbeda

f. Kelarutan Protein pada kondisi Lingkungan Ekstrim
Tujuannya: memperlihatkan bahwa sifat alamiah protein, antara lain daya larut, sangat dipengaruhi oleh suhu dan keasaman (pH) tertentu. Perubahan yang ekstrim pada salah satu kondisi ini akan merusak sifat alamiah protein (denaturasi), yang tampak berupa hilangnya daya larut.
Dasarnya : sifat alamiah protein, termasuk daya larut, tampak bila struktur tersier protein tersebut dalam suhu dan pH tertentu dapat berinteraksi dengan air. Bila salah satu dari kedua faktor ini berubah, struktur tersier juga berubah dan molekul protein tidak dapat lagi dikelilingi air. Akibatnya, sifat alamiah, termasuk daya larut hilang dan protein mengendap.

g. Pengendapan protein oleh logam berat
Tujuannya: Memperlihatkan logam berat seperti timah hitam (Pb) dan air raksa (Hg) dapat mengganggu sifat protein, antara lain kelarutannya, sehingga tidak berfungsi lagi dan mengendap. Disatu pihak logam berat sebagai pencemar lingkungan sangat berbahaya, sedangkan dipihak lain sifat ini dapat dipakai sebagai antiseptik pembunuh kuman, seperti yang tampak pada penggunaan sublimat (HgCl2). Keracunan logam berat yang akut maupun kronis dapat dikurangi dengan mengkonsumsi protein dalam jumlah lebih banyak seperti susu dan telur. Pada keracunan akut, pemberian susu atau putih telur akan mengendapkan logam berat dalam bentuk garam protein, sehingga penyerapan logam berkurang. Pada keracunan kronis, fungsi protein sel yang telah rusak oleh ikatan dengan logam berat dapat diimbangi dengan sintosis protein baru, yang asam aminonya berasal dari protein makanan ekstra tersebut.
Dasarnya : Logam berat, termasuk Pb dan Hg, dengan protein membentuk garam proteinat yang tidak dapat larut, sehingga fungsi protein tersebut hilang